腸集聚性大腸桿菌(EAEC)熒光PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:腸集聚性大腸桿菌(EAEC)核酸擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒(PCR 熒光探針?lè)?
Name :Enteroconcentric Escherichia coli (EAEC) nucleic acid amplification detection kit (PCR fluorescence probe method)
【包裝規(guī)格】48T/盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒適用于檢測(cè)水樣糞便等樣本中的腸集聚性大腸桿菌,用于腸集聚性大腸桿菌感染的輔助診斷,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用 TaqMan 探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù),設(shè)計(jì)一對(duì)腸集聚性大腸桿菌特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光PCR 技術(shù)對(duì)腸集聚性大腸桿菌的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè), 用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。
【試劑組成】
1011-48中華鱉虹彩病毒(STIV)核酸檢測(cè)試劑盒 (熒光-PCR法) |
0811-48魚(yú)類神經(jīng)壞死病毒(VNN)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
0911-48羅湖病毒(TiLV)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
0221-48河弧菌(VF)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
0421-48出血性大腸桿菌O157:H7(EHEC O157)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
0721-48沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
0821-48沙門氏菌SPP-spy核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。
4. PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
4.1 將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);
4.2 設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL;
5. 結(jié)果分析判定
【注意事項(xiàng)】
1211-48兔出血癥病毒2型(RHDV-2)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
1411-48塞尼卡谷病毒(SVV)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
1611-48小反芻獸疫病毒野毒株(PPRV-W)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
1711-48牛副流感病毒3型(BPIV-3)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
1811-48牛呼腸孤病毒(BRV)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
1911-48牛呼吸道合胞體病毒(BRSV)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
5.1 結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。
5.2 結(jié)果判斷
陽(yáng)性:檢測(cè)通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線。
可疑:檢測(cè)通道 Ct 值>35.0,且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn),重復(fù)試驗(yàn)
結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和典型擴(kuò)增曲線者為陽(yáng)性,否則為陰性。
陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果無(wú) Ct 值且無(wú)明顯的擴(kuò)增曲線。
6. 檢測(cè)方法的局限性
1)樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);
2)樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;
3)陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;
4)病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
5)不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
6)試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果;
7)本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。
7. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品:無(wú)明顯擴(kuò)增曲線或無(wú) Ct 值顯示;
陽(yáng)性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
8. 產(chǎn)品性能指標(biāo)
陰陽(yáng)性參考品符合率:5 份陽(yáng)性參考品符合率為 100%;10 份陰性參考品符合率為100%。
低檢測(cè)限:1.0×10 3copies/mL。
精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
公司優(yōu)勢(shì):
1)質(zhì)量:我司提供的的試劑為世界
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0711-48西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
1011-48異嗜性小鼠白血病病毒(X-MuLV)核酸檢測(cè)(熒光-PCR法) |
1111-48兔出血癥病毒通用型(RHDV)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |