人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA試劑盒
規(guī)格:96T/48T
用途:用于檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等樣本中人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)濃度。
使用前請仔細閱讀說明書。如果有任何問題,請聯(lián)系我們。
具體保質(zhì)期請見試劑盒外包裝標簽。請在保質(zhì)期內(nèi)使用試劑盒。聯(lián)系時請?zhí)峁┊a(chǎn)品貨號、生產(chǎn)日期(見盒簽),以便我們更高效為您服務。
【試劑盒性能】
物理性能:各液體組分澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝,無破損漏氣。
校準曲線線性:校準品劑量反應曲線相關(guān)系數(shù) r 值,大于等于 0.9900。
精密度:批內(nèi)變異系數(shù) CV%小于 10%;批間變異系數(shù) CV%小于 15%。
回收率:回收率在 85%-115%之間。
敏感性:本試劑盒識別人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP),與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。
穩(wěn)定性:2℃-8℃保存,有效期 6 個月。
【實驗原理】
人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中指標表達。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中指標相結(jié)合,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)與待測樣品中人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)的濃度正相關(guān)。擬合校準品曲線,可以計算出樣本中人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)的濃度。
【試劑盒組成】
注意:
1、使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數(shù)量與表格是否一致。
2、試劑盒 2-8℃保存,不得使用過期試劑盒。
3、包被微孔板單次未使用完,要謹記密封放到 2-8℃保存。
4、如果試劑盒的組份需要再次使用,請確保上一次使用之后沒有被污染。
【樣品的準備和保存】
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中, 不得使用疊氮鈉做為防腐劑。樣品如果不立即分析,應分裝后冷凍保存, 且避免反復凍融。
細胞培養(yǎng)上清:離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血清:用干凈試管收集血液,室溫凝固 30 分鐘,離心 2000×g 20 分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血漿:采用肝素、檸檬酸鹽或 EDTA 抗凝,抽血后 30 分鐘內(nèi)在2-8℃離心 2000×g 20 分鐘。為消除血小板的影響,建議在 2-8℃進一步離心 10000×g 10 分鐘。立即分析或分后-20℃冷凍保存。
細胞裂解液:對于貼壁細胞,去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液,用移液器吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常 10 秒后,細胞就會被裂解。對于懸浮細胞,離心收集細胞,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液,用移液器吹打把細胞吹散,用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后,10000—14000×g 離心 3-5 分鐘, 取上清。立即分析或分裝后-20℃ 冷凍保存。
尿液:用無菌管收集,離心 2000×g 20 分鐘。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。
【注意事項】
1、本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷。
2、試驗中請穿著實驗服并戴乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時,請按國家生物試驗室安全防護條例執(zhí)行。
3、嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
4、洗板不正確可能導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
5、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值。
6、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色。
7、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
8、在儲存和溫育時避免強光直接照射。
9、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
10、任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
11、檢測使用的酶標儀需要安裝能檢測 450±10nm 波長的濾光片,
光密度范圍在 0-3.5 之間。建議使用時提前 15 分鐘預熱。
12、請勿使用其他批號或其他來源的試劑混合或替代本試劑盒中的試劑。
13、試驗中所用的 EP 管和吸頭均為一次性使用,嚴禁混用。
14、請勿使用過期的試劑。
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