小反芻獸通用疫苗PPR-U/PPR-V熒光PCR試劑盒說明書
通用名稱:小反芻獸疫通用型/疫苗株(PPR-U/ PPR-V)雙重核酸檢測(cè)試劑盒(實(shí)時(shí)熒光-PCR法)
英文名稱:Dual nucleic acid detection kit for universal/vaccine strain of small ruminant disease (PPR-U/PPR-V) (real-time fluorescence-PCR)
二、包裝規(guī)格 25T/盒、50T/盒
三、預(yù)期用途 小反芻獸疫病毒檢測(cè)試劑盒利用實(shí)時(shí)熒光PCR原理,定性檢測(cè)小反芻獸疫病毒,對(duì)小反芻獸疫病毒引起的疾病診斷及療效評(píng)估有重要指導(dǎo)意義。
四、小反芻獸疫病毒檢測(cè)試劑盒原理
小反芻獸疫病毒檢測(cè)試劑盒針對(duì)小反芻獸疫病毒的高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和探針,在反應(yīng)體系中含小反芻獸疫病毒基因組模板的情況下,PCR反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號(hào)。利用熒光定量PCR儀對(duì)PCR過程中相應(yīng)通道信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和輸出,實(shí)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果的定性分析。
五、小反芻獸疫病毒檢測(cè)試劑盒組成
RT-PCR反應(yīng)液、逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照
六、儲(chǔ)存及有效期
避光-20℃以下保存,避免反復(fù)凍融,有效期為12個(gè)月。
七、適用儀器 ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列 、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
【試劑組成】
名 稱 規(guī) 格
酶液 50μL×1 管
反應(yīng)液 1.0mL×1 管
陽性質(zhì)控品 50μL ×1 管
陰性質(zhì)控品 250μL ×1 管
注:
1)不同批號(hào)試劑不能混用。
2)試劑盒內(nèi)各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標(biāo)示的檢測(cè)次數(shù)。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個(gè)月。
【標(biāo)本采集】
病死或撲殺禽,取喉氣管、腦、胸肌、心肌和肺等組織;待檢活禽,用棉拭子取呼吸道分泌物或排泄物,置于 1mL 50%甘油生理鹽水中。
【保存和運(yùn)輸】
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長(zhǎng)期保存可置-70℃,但不能超過 6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
1.2RNA 提取
推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的RNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請(qǐng)按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。
2.試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽性對(duì)照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
6.質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品:無明顯擴(kuò)增曲線丏無 Ct 值顯示;
陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,丏 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。
公司優(yōu)勢(shì):
1)質(zhì)量:我司提供的的試劑為世界
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