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產(chǎn)品名稱:

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR核酸擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào): 產(chǎn)品時(shí)間: 2023-03-08
鼠疫桿菌(YP)熒光PCR核酸擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒適用于檢測(cè)全血等樣本中的鼠疫桿菌,用于鼠疫桿菌感染的輔助診斷,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
本試劑盒用一對(duì)鼠疫桿菌特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)鼠疫桿菌的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。

產(chǎn)品概述

鼠疫桿菌(YP)熒光PCR核酸擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:鼠疫桿菌 (YP)核酸擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒(PCR 熒光探針法)

Name :Diagnostic Kit for Yersinia Pestis DNA (PCR Fluorescence Probing)

【包裝規(guī)格】48T/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測(cè)全血等樣本中的鼠疫桿菌,用于鼠疫桿菌感染的輔助診斷,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒用一對(duì)鼠疫桿菌特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)鼠疫桿菌的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。

【試劑組成】

名 稱 規(guī) 格

核酸提取液 1.5ml×2 管

酶液 50μl×1 管

YP 反應(yīng)液 1.0ml×1 管

YP 陽性質(zhì)控品 50μl ×1 管

陰性質(zhì)控品 250μl ×1 管

說明:不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。

【儲(chǔ)存條件和有效期】

試劑盒保存于-20±5℃,有效期 12 個(gè)月;

避免反復(fù)凍融,凍融次數(shù)不超過 5 次;試劑開瓶后,在室溫條件下放置時(shí)間不

應(yīng)超過 8 小時(shí);運(yùn)輸采用干冰(或者冰袋)保持低溫,運(yùn)輸時(shí)間不應(yīng)超過 4 天。試

劑盒生產(chǎn)日期見產(chǎn)品標(biāo)簽。

【適用儀器】

ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ

Opticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

【標(biāo)本要求】

標(biāo)本采集:用注射器取血 5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管

保存運(yùn)輸:上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長(zhǎng)期保存可置-70℃,但不能超過

6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1樣本前處理

取抗凝血下層血細(xì)胞 50uL,加入 100uL 雙蒸水吹勻

1.2DNA 提取

1) 對(duì)上述處理好的標(biāo)本加入等體積核酸提取液(固體標(biāo)本加入50uL核酸提取液),

100℃恒溫處理 10 分鐘,13,000 rpm 離心 5 分鐘,取上清液轉(zhuǎn)移至新的 1.5ml

EP 管,-20℃保存;

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的 DNA 提取試劑

盒(離心柱提取法),請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2. 試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性

對(duì)照+1 管陽性對(duì)照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:

試劑 YP 反應(yīng)液 酶液

用量(樣本數(shù)為 N) 20μl 1μl

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μl,分別加入相應(yīng)的反

應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))

4.1 將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);

4.2 設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25ul;

熒光通道選擇: 檢測(cè)通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)

NONE,請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光。

4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:

步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時(shí)間 收集熒光信號(hào)

1 1 cycle 95℃ 10min 否

2 40 cycle

94℃ 15sec 否

55℃ 30sec 是

5. 結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出

現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍

內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上

下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。

5.2結(jié)果判斷

陽性:檢測(cè)通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線;

可疑:檢測(cè)通道 35.0<Ct 值≤37,建議重復(fù)檢測(cè),如果檢測(cè)通道仍為 35.0<Ct

值≤37,且曲線有明顯的增長(zhǎng)曲線,判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>37 或無 Ct 值。

7. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示;

陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,且 Ct 值≤32;

以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

8. 產(chǎn)品性能指標(biāo)

陰陽性參考品符合率:8 份陽性參考品符合率為 100%;10 份陰性參考品符合

率為 100%。

低檢測(cè)限:2.0×102copies/ml。

精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測(cè) Ct 值的變異系數(shù)(CV)均≤3%。

公司優(yōu)勢(shì):
1)質(zhì)量:我司提供的的試劑為世界
2)價(jià)格:價(jià)格實(shí)惠,量大從優(yōu)。
4)服務(wù):提供完整的售前、售后和售中服務(wù)。售后到底

如需訂購(gòu)鼠疫桿菌(YP)熒光PCR核酸擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒,請(qǐng)聯(lián)系我們。

此外公司還提供:

1511大豆源性成分(Lectin)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1411木瓜源性成分(Papaya)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1311植物源性成分(RBCL)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1211馬源性成分(Hor)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1111蟹源性成分(Cytb)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1011蝦源性成分(FC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

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