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產(chǎn)品介紹
呼吸道合胞病毒抗原快速檢測卡(膠體金法)?
用途
用于定性檢測有癥狀病人鼻沖洗液或鼻咽拭子標(biāo)本中的呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白抗原的免疫層析試驗(yàn)。該試驗(yàn)旨在用于新生兒或5歲以下兒童呼吸道合胞病毒感染的體外診斷。建議陰性結(jié)果做細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)一步證實(shí)。
摘要和解釋
RSV是上呼吸道和下呼吸道感染的常見原因,也是嬰幼兒患細(xì)支氣管炎和肺炎的主要原因。RSV在每年的秋天、冬天和春天有規(guī)律的發(fā)生,出現(xiàn)感染和暴發(fā)。雖然RSV在較大兒童和成人可引起顯著的呼吸道疾病,但比嬰幼兒緩和的多。為了獲得有效的抗菌治療,RSV的快速鑒定診斷就顯得特別重要??焖勹b定可以減少住院時間,減少抗菌素的使用,減少住院治療費(fèi)。
呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)提供了一種簡便快速檢測鼻洗液和鼻咽拭子標(biāo)本中的 RSV的方法。由于它的簡便快速性,有助于做出治療和住院的決定。
測試原理
呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)是一種用鼻洗液和鼻咽拭子標(biāo)本檢測RSV融合蛋白抗原的免疫層析膜試驗(yàn)??筊SV抗體,樣本線,吸附到硝酸纖維素膜上,對照抗體作為第二條線吸附到同一膜上??筊SV和對照抗體結(jié)合到可視粒子上,這種粒子干燥結(jié)合到惰性纖維支持物上。形成的結(jié)合物墊和有條紋的膜結(jié)合形成檢測條。檢測條置于一個硬紙盒的右邊,這個硬紙盒是一個書形的絞鏈的檢測裝置。拭子標(biāo)本(對照和病人的)需要一個預(yù)備步驟,鼻洗液標(biāo)本不需要預(yù)備。執(zhí)行試驗(yàn)時,測試樣本加到檢測條的頂部的白墊上,閉合檢測裝置。標(biāo)本中的存在的RSV抗原與抗RSV抗體結(jié)合物結(jié)合,形成的抗原結(jié)合物復(fù)合物被固定的抗RSV抗體捕獲,形成樣本線。固定的對照線抗體捕獲一個可視的結(jié)合物,形成一條粉紅色的對照線。對照線在未檢測的裝置中是藍(lán)色的。試驗(yàn)結(jié)果用可視的檢測的粉紅色到紫色線的存在與否來解釋。陽性結(jié)果,在15分鐘讀數(shù)時,會出現(xiàn)一條樣本線和一條對照線。陰性結(jié)果,在15分鐘讀數(shù)時,只出現(xiàn)一條對照線,表明樣本中未檢測到RSV抗原。對照線未出現(xiàn),或仍為藍(lán)色,表示無論樣本線出現(xiàn)與否,測試無效。
試劑和材料
提供的材料
檢測卡:包被有鼠抗RSV抗原特異抗體和對照線抗體的膜與鼠抗RSV抗體結(jié)合物和對照線抗體結(jié)合物結(jié)合在一個折合式檢測卡上。未檢測的膜在對照線區(qū)域有一條藍(lán)色線。
移液管:固定體積(100μl)的移液管用于將樣本轉(zhuǎn)移到檢測裝置中。只能用Binax提供或能轉(zhuǎn)移100μl樣本體積的校正管。
陽性對照拭子:滅活的RSV干燥結(jié)合到拭子上。
陰性對照拭子;滅活的A群鏈球菌干燥結(jié)合到拭子上。
對照拭子用的瓶裝洗脫液:盛有一定體積(0.5ml)洗脫液,用于洗脫對照拭子。不要使用其他洗脫液。
未提供的材料
時鐘、秒表或跑表;鼻洗液收集容器,鼻咽拭子,運(yùn)輸媒介。
可選物品
鼻咽(NP)拭子標(biāo)本附件包:
鼻咽拭子:用于呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)的無菌泡沫拭子。
用于拭子標(biāo)本的洗脫液小瓶:
瓶中盛有一定體積的洗脫液(0.5 ml),用于處理要測試的拭子標(biāo)本。
注意事項(xiàng)
1. 體外診斷用。
2. 使用前要將檢測裝置密封在錫箔中。
3. 不要使用過期的試劑盒。
4. 不要將不同批號試劑盒的試劑混合使用。
5. 檢測條頂部的白色樣本墊盛有從病毒中提取靶抗原的試劑,為了保證Z佳操作,加樣時將標(biāo)本慢慢加到墊的中央,以使所有樣本都吸附到墊上。
6. RSV陽性對照拭子是用滅活的RSV感染組織培養(yǎng)細(xì)胞準(zhǔn)備的,隨后用生物測定程序進(jìn)行了測試。測定時要遵守一切注意事項(xiàng)。樣本可能有感染性,應(yīng)當(dāng)根據(jù)地方、州和聯(lián)邦的法規(guī)建立處理和處置措施。
7. 檢測中加入的試劑不足時會出現(xiàn)無效結(jié)果。為確保加入足夠量的體積,在將吸管中的內(nèi)容物加到樣本墊上時,要確定移液管的下部是充盈的、沒有氣泡產(chǎn)生。如果有空氣存在,通過擠壓上部的吸球,將標(biāo)本排回到容器中,重新吸入標(biāo)本。必要時,換一個新吸管。
8. 測試鼻洗液標(biāo)本時,吸樣本時要避開粘液部分。如果吸管堵塞,致使下部柄部不充盈,通過擠壓上部的吸球把標(biāo)本排回到容器中,重吸樣本,必要時換一個新吸管。
9. 聚酯、人造纖維、泡沫和棉花鼻咽拭子都有易彎曲的柄,評估發(fā)現(xiàn)這些都可用于呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)。不要用藻酸鈣鼻咽拭子。
10. 所有移液管和洗脫瓶都是單次使用的,不要用于多個樣本。
貯存和穩(wěn)定性
試劑盒在室溫(59-86℉,15-30℃)保存,呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)在失效期前是穩(wěn)定的。失效期標(biāo)注在外包裝和盒內(nèi)。
標(biāo)本采集和處理
為了取得Z佳結(jié)果,請使用新鮮鼻咽拭子或鼻洗液標(biāo)本。
鼻咽拭子:
聚酯、人造纖維、泡沫和棉花鼻咽拭子都有易彎曲的柄,評估發(fā)現(xiàn)這些都可用于本試劑盒。將收集后的拭子標(biāo)本在1小時內(nèi)加入到0.5~3.0ml的適宜的液體轉(zhuǎn)移系統(tǒng)中。如果不能立即測定,洗脫液拭子標(biāo)本可在室溫保存4小時,或2-8℃保存48小時。測試前將標(biāo)本平衡至室溫,并輕輕旋動。
鼻洗液:
用與病人年齡相稱的操作,在標(biāo)準(zhǔn)采樣杯中收集洗液標(biāo)本。如果不能立即測定,洗液可在室溫保存4小時,或2-8℃保存48小時。測試前將標(biāo)本平衡至室溫,并輕輕旋動。洗液標(biāo)本可在測試前加入到3.0ml的適宜的液體轉(zhuǎn)移系統(tǒng)中。轉(zhuǎn)移介質(zhì)可導(dǎo)致洗液稀釋,這種稀釋可能像操作部分報道的那樣降低試驗(yàn)敏感性。
轉(zhuǎn)移介質(zhì):
下列轉(zhuǎn)移介質(zhì)受過測試,適用于本試劑盒。
Amies介質(zhì)
Binax洗脫液
Hank,s鹽平衡液
M4介質(zhì)
M4RT介質(zhì)
M5介質(zhì)
鹽水
Stuart,s介質(zhì)
質(zhì)量控制
日常質(zhì)量控制:
呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)內(nèi)嵌有操作對照。作為日常質(zhì)量控制,Binax建議每次試驗(yàn)都要記錄這些對照結(jié)果。
操作對照
A.未檢測裝置在對照位置有一根藍(lán)色線。如果進(jìn)行試驗(yàn)試劑起作用了,檢測裝置中的這根藍(lán)色線將變?yōu)榉奂t色。
B. 結(jié)果窗口中清晰的背景顏色是陰性背景對照,15分鐘內(nèi)窗口背景顏色會從粉紅色到白色。背景顏色不應(yīng)干擾測試。
外部陰陽性對照:
建議用陰陽性對照確保:
l 所用試劑有效
l 試驗(yàn)操作正確
呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)內(nèi)裝有陰陽性對照拭子。這些拭子將監(jiān)控試劑故障。陽性對照確保測定準(zhǔn)確。每打開一個新試劑盒都要測試這些拭子,其他對照遵照下列要求做:
l 地方、州和/或聯(lián)邦法規(guī)
l 遵照集團(tuán)和/或本試驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制程序
為了正確指導(dǎo)質(zhì)量控制操作,請參閱NCCLS EP12A和42CFR493.1202(C)(僅限美國用戶)。
如果未得到正確的質(zhì)控結(jié)果,請不要報告病人結(jié)果,在工作時間聯(lián)系Binax技術(shù)部(EST)。
樣本準(zhǔn)備步驟
鼻洗液:
鼻洗液樣本不需要預(yù)備,直接進(jìn)入測定程序。
鼻咽拭子:
在0.5-3.0ml的液體轉(zhuǎn)移系統(tǒng)中轉(zhuǎn)動洗脫拭子,進(jìn)入測試程序。注意:如果在Binax洗脫液中洗脫拭子,按照下列程序預(yù)備對照拭子。
對照拭子:
1. 試劑盒內(nèi)盛有裝滿洗脫液的小瓶,將瓶蓋開啟。
2. 將欲測試拭子放入瓶中,將拭子在液體中轉(zhuǎn)動3圈。
3. 將拭子按在瓶壁上轉(zhuǎn)動,使樣本從拭子中移出。
4. 扔掉拭子。
5. 盡早檢測液體樣本,進(jìn)入檢測程序。
測試程序
1. 測試前將裝置從錫箔中取出平放在工作臺上。
2. 將移液頭插入液體樣本中,擠壓上部吸球吸液。當(dāng)吸液頭部注滿液體后松開吸球,這將會把液體吸入移液管中。移液管下部不要產(chǎn)生空氣。
3. 看檢測裝置上的箭頭找到白色樣本墊,通過擠壓上部吸球,慢慢將移液管中液體全部(100μl)加入到樣本墊的中部。
4. 立即從檢測裝置中揭去粘附襯,合上并密封裝置,15分鐘時讀窗口中的結(jié)果。早于或晚于15分鐘結(jié)果可能不準(zhǔn)確。
注意:讀結(jié)果時,如有必要,將裝置傾斜以減少眩光。
結(jié)果解釋
對陰性標(biāo)本,窗口底部的藍(lán)色對照線變紫紅色,無其他線出現(xiàn)。
對陽性標(biāo)本,藍(lán)色對照線變紫紅色,上部的樣本線也變紫紅色。
如果對照線仍為藍(lán)色或根本沒有出現(xiàn),試驗(yàn)結(jié)果無效。
對無效試驗(yàn),用一新的檢測裝置重做。如果問題沒有解決,電告Binax技術(shù)部。
結(jié)果報告
建議報告結(jié)果
陽性
RSV抗原陽性?;畈《敬嬖跁r可能出現(xiàn)陽性結(jié)果。
陰性
RSV抗原陰性。由于RSV不能被排除的感染,樣本中的抗原可能在檢出限以下。Binax建議對陰性樣本做培養(yǎng)。
局限性
呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)檢測活的和死的RSV。測試結(jié)果與標(biāo)本中的抗原量有關(guān),可能與用同一標(biāo)本做細(xì)胞培養(yǎng)所得結(jié)果不*。
標(biāo)本采集量不足或病毒排出水平低可能出現(xiàn)差一點(diǎn)的結(jié)果,甚至可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
陰性結(jié)果不能排除RSV感染,也不能排除造成呼吸道感染的其他病毒的感染。因此,所得結(jié)果要結(jié)合臨床結(jié)果作出準(zhǔn)確診斷。Binax測試結(jié)果在用palivizumab治療的病人中還沒進(jìn)行評估。
然而一項(xiàng)分析研究表明palivizumab干擾呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)檢測RSV的能力。
抗菌素和干擾素的干擾潛力還未確定。
單克隆抗體可能不能檢測所有抗原變異株或新株RSV。
預(yù)期值
RSV的流行年年不同,在秋、冬季暴發(fā)。RSV的陽性檢出率受許多因素影響,包括標(biāo)本采集方法,所用試驗(yàn)方法,地理位置,特定區(qū)域的流行。2002年Binax臨床研究中,在洗液標(biāo)本中RSV的平均流行是2%,咽拭子標(biāo)本中是4%。2003年收集的鼻咽拭子標(biāo)本中RSV的流行是21%。
沙丁胺醇檢測試劑盒(酶免) |
安定類檢測試劑盒(酶免) |
恩諾沙星檢測試劑盒(酶免) |
性能數(shù)據(jù)
分析研究
分析反應(yīng)性
已知2個亞群的RSV,每個亞群都保留有呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)作為靶位的融合蛋白2。
6株A亞群分離菌和5株B亞群分離菌用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)測試為陽性,測試的濃度范圍為1.56×101TCID50/ml到5.00×104TCID/ml。
注意:已報道的TCID50/ml水平是由一系列因素決定的,包括:使用的細(xì)胞培養(yǎng)系,傳代數(shù)目,各種分離菌的數(shù)目。
分析特異性(交叉反應(yīng)性)
為了測定呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)的分析特異性,測試了48株可能共棲存在在鼻腔或鼻咽部的病原微生物(28株細(xì)菌,20株病毒)。所有下列微生物在濃度大于1×105TCID50/ml(病毒)或大于1×108/ml(細(xì)菌)時,結(jié)果是陰性的。肺間質(zhì)病毒在2×103TCID50/ml測定沒有交叉反應(yīng)性。
細(xì)菌 | 病毒 |
不動桿菌屬 | 腺病毒5* |
百日咳鮑特氏菌 | 腺病毒7* |
白色假絲酵母菌 | 巨細(xì)胞病毒* |
糞腸球菌 | 冠狀病毒* |
大腸埃希氏菌 | 柯薩奇病毒B4* |
陰道加德納氏菌 | 甲型流感 2/日本/305/57 |
流感嗜血桿菌 | 甲型流感/香港/8/68 |
肺炎克雷伯氏菌 | 甲型流感/Aichi/68 |
格氏乳酸桿菌 | 甲型流感/PR/8/34 |
嗜肺軍團(tuán)菌 | 甲型流感/維多利亞/3/75 |
產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌 | 甲型流感1/FM/1/47 |
卡他莫拉菌屬 | 乙型流感 Allen/45 |
淋病奈瑟氏菌 | 乙型流感 Lee/40 |
腦膜炎奈瑟氏菌 | 乙型流感 Mass/3/66 |
干燥奈瑟氏菌 | 乙型流感 Maryland/1/59 |
淺黃奈瑟菌 | 乙型流感中國臺灣/2/62 |
普通變型桿菌 | 肺間質(zhì)病毒 |
細(xì)菌 | 病毒 |
銅綠假單胞菌 | 副流感病毒1* |
黏質(zhì)沙雷菌 | 副流感病毒2* |
金黃色葡萄球菌 | 副流感病毒3* |
金黃色葡萄球菌(產(chǎn)蛋白A株) |
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表皮葡萄球菌 |
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A群鏈球菌 |
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B群鏈球菌 |
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C群鏈球菌 |
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F群鏈球菌 |
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變異群鏈球菌 |
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肺炎鏈球菌 |
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這些病毒株是從美國收集獲得的(ATCC),帶有滴度信息,但滴度沒被Binax驗(yàn)證。
干擾物質(zhì);
下列物質(zhì),自然存在于呼吸道標(biāo)本或由人工導(dǎo)入鼻腔或鼻咽部,經(jīng)測評,在下列濃度未發(fā)現(xiàn)對呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)造成影響。
物質(zhì) | 濃度 |
全血 | 2% |
3OTC嗽口液 | 25% |
3OTC喉腔滴液 | 25% |
3OTC鼻霧化劑 | 25% |
4acetamidophenol | 10mg/ml |
乙酰水楊酸 | 20mg/ml |
albuterol | 20mg/ml |
撲爾敏 | 5mg/ml |
美沙芬 | 10mg/ml |
苯海拉明 | 5mg/ml |
愈創(chuàng)木酚甘油 | 20mg/ml |
oxymetazoline | 10mg/ml |
Phenylephrine | 100mg/ml |
苯丙醇胺 | 20mg/ml |
Rebetol eq oac(○,R)R | 500ng/ml |
Relenza eq oac(○,R)R | 20mg/ml |
金剛烷乙胺 | 500ng/ml |
Tamiflu eq oac(○,R)R | 100mg/ml |
臨床研究
鼻洗液—臨床特異性(前瞻性研究):
2002年流感期間,在遍及全美的醫(yī)生辦公室和診所對呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)結(jié)果和細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行了多中心比較研究。鼻洗液標(biāo)本是從呈現(xiàn)RSV樣癥狀3天左右的兒童或成人采得,并且用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)進(jìn)行了評價。試驗(yàn)人群女性約占46%,男性約占54%。該研究中的病人不包括從登記之日起6個月內(nèi)接種過流感疫苗的病人,也不包括30日內(nèi)服用過流感或RSV藥物的病人。沒有無效結(jié)果被報道。191份鼻洗液標(biāo)本分4組測試。呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)總特異性是98%,總測試*性是98%,95%可信區(qū)間如下所示。
鼻洗液培養(yǎng)基
+ -
3 | 3 |
1 | 184 |
NOW eq oac(○,R)R +
結(jié)果 -
95%CI特異性=98%(184/187)(95.4% 99.4%)總*性=98%(187/191)(94.7% 99.1%)
呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)在4個測試點(diǎn)相似操作,如下表所示
| 陽性分?jǐn)?shù) | 特異性 | ||
NOW eq oac(○,R)R/培養(yǎng) | NOW eq oac(○,R)R/培養(yǎng) | % | 95%CI | |
地點(diǎn)1 | 1/1 | 91/94 | 97 | 91.1-98.8 |
地點(diǎn)2 | 2/3 | 83/83 | 100 | 95.7-100 |
地點(diǎn)3 | 0/0 | 6/6 | 100 | 59.0-99.6 |
地點(diǎn)4 | 0/0 | 4/4 | 100 | 47.8-99.5 |
鼻洗液—臨床敏感性和特異性(回顧性研究):
自從在前瞻性研究中少量陽性培養(yǎng)基證實(shí)有RSV感染產(chǎn)生以來,進(jìn)行了一次回顧性研究,如下所示。用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)對47份RSV培養(yǎng)陽性標(biāo)本和12份RSV培養(yǎng)陰性標(biāo)本的鼻洗液進(jìn)行了評估。所有標(biāo)本均來自一所大學(xué)醫(yī)學(xué)中心,所有病人都住在美國東北部。試驗(yàn)人群男性占約49%,女性約占51%。呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)敏感性是89%,然而試驗(yàn)特異性是100%,總試驗(yàn)*性是92%,95%可信區(qū)間如下所示。
培養(yǎng)
+ -
42 | 0 |
5 | 12 |
NOW eq oac(○,R)R +
結(jié)果 -
敏感性=89%(42/47)(77.3%-95.3%)
特異性=100%(12/12)(75.3%- 99.8%)
總*性=92%(54/59)(81.6%- 96.2)
鼻咽拭子敏感性和特異性(前瞻性研究):
在2002年和2003年流感季節(jié),在美國一家研究中心對呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行了比較研究。鼻咽拭子標(biāo)本取自有RSV或流感癥狀的兒童。在用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)評價前所有拭子標(biāo)本都放入0.5-3ml的轉(zhuǎn)移介質(zhì)中。試驗(yàn)人群中女性占43%,男性占57%。測試了179份鼻咽拭子標(biāo)本,全為有效標(biāo)本。呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)的試驗(yàn)敏感性、特異性和總*性與培養(yǎng)/FDA比較是93%。95%可信區(qū)間如下所示。
培養(yǎng)/DFA
+ -
25 | 1 |
2 | 142 |
NOW eq oac(○,R)R +
結(jié)果 -
敏感性=93%(25/27)(76.5%-97.7%)
特異性=93%(142/152)(88.3%- 96.4%)
總*性=93%(167/179)(88.6%- 96.1)
呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)在所有試驗(yàn)點(diǎn)相似操作,如下表所示。
地點(diǎn) | 敏感性 | ||
# | % | 95%CI | |
1 | 14/15 | 93 | 69.8-98.4 |
2 | 9/10 | 90 | 58.7-97.7 |
3 | 0/0 | NA | NA |
4 | 2/2 | 100 | 29.2-99.2 |
地點(diǎn) | 特異性 | ||
# | % | 95%CI | |
1 | 69/74 | 93 | 85.1-97.0 |
2 | 20/23 | 87 | 67.6-95.3 |
3 | 16/18 | 89 | 66.9-96.6 |
4 | 37/37 | 100 | 90.7-99.9 |
重復(fù)性研究:
在3個獨(dú)立的地點(diǎn)將包括陰性、弱陽性、陽性的標(biāo)本編碼分組,利用呼吸道合胞病毒抗原檢測試劑盒(膠體金法)進(jìn)行單盲研究。參與者在3天內(nèi)對每一標(biāo)本進(jìn)行多次測試。234份標(biāo)本100%得到預(yù)期結(jié)果,95%可信區(qū)間為98.4-100%。
參考文獻(xiàn)
1) Williams, KM, Jackon MA, Hamiliton M. Rapid Diagnostic Testing for URIs in Children: Impact on Physician Decision Making and Cost. Infect. Med. 19(3): 109-111, 2002.
2) Lopez, Juan A., R. Bustos, C. Orvell, M. Berois, J. Arbiza, B. Garcia-Barreno, J.Melero. Antigenic Structure of Human Respiratory Syncytial Virus Fusion Glycoprotein. Jr. of Virology, vol. 72, no.8, August 1998, pp.6922-6928.
公司優(yōu)勢:
1)質(zhì)量:我司提供的的試劑均經(jīng)過出廠檢測。產(chǎn)品質(zhì)量有保證。
2)價格:價格實(shí)惠,量大從優(yōu)。
3)服務(wù):提供完整的售前、售后和售中服務(wù)。售后到底。
除了呼吸道合胞病毒抗原快速檢測卡(膠體金法)?我公司還提供:
β-內(nèi)酰胺類快速檢測卡 |
克倫特羅檢測試劑盒(酶免) |
萊克多巴胺檢測試劑盒(酶免) |