產(chǎn)品介紹
西尼羅病毒(WN)IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒
僅供科研使用
用途
西尼羅(WN)病毒IgM ELISA,利用了西尼羅重組抗原檢測(cè)人體血清或血漿中的西尼羅抗體。本實(shí)驗(yàn)僅用于輔助診斷人感染了西尼羅病毒,不用于篩查血液或血液成分。僅供專業(yè)人員體外診斷使用。
概述
感染了西尼羅病毒會(huì)導(dǎo)致包括腦炎等一系列癥狀的疾病,西尼羅病毒在世界廣泛傳播,已在50多個(gè)國(guó)家檢測(cè)出該病毒。本試驗(yàn)經(jīng)CDC提供的試劑檢驗(yàn)與驗(yàn)證。本試驗(yàn)使用了一種稱為WNRA的重組抗原,它可以作為西尼羅病毒感染的快速血清學(xué)指標(biāo),WNRA蛋白是一種重組抗原,它是由含有西尼羅病毒兩個(gè)抗原的序列多肽構(gòu)成。
實(shí)驗(yàn)的原理
檢測(cè)西尼羅病毒IgM ELISA 是基于兩步夾心法原理制造的。
提供的材料
1. 微孔板(96孔 12x8):即用 每孔均包被結(jié)合西尼羅重組抗原的單抗。2-8℃下保存至保質(zhì)期。
注意:WNRA和NCA已包被于微孔板。
2. IgM樣品稀釋液:1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
3. IgM陰性質(zhì)控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲(chǔ)存。
4. IgM陽(yáng)性質(zhì)控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲(chǔ)存。
5. 洗滌液(10X):1瓶 120ml 2-8℃下保存至使用。
6. EnWash:1瓶 20ml 2-8℃下保存至使用。
7. 酶聯(lián)物:一瓶6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
8. TMB底物液: 1支 9ml 即用 2-8℃下保存至使用。
9. 終止液;1支6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
苯二氮卓類快篩試劑盒 |
噻嗪類(氫氯噻嗪)快篩試劑盒 |
白蛋白快篩試劑盒 |
試劑應(yīng)避免反復(fù)凍融。
操作步驟
在使用前將所有試劑和樣品平衡至室溫,并輕輕倒轉(zhuǎn)使其充分混勻。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
將10X的濃縮洗滌液稀釋,將120ml的濃縮洗滌液加上1080ml的蒸餾水,搖勻,至無任何沉淀,稀釋好的洗滌液多可在室溫下放置兩個(gè)星期。
準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)所需的板條,剩余的板條應(yīng)盡快放入袋子里重新密封,在2-8℃下儲(chǔ)存至保質(zhì)期。
操作步驟:
1. 標(biāo)記將要使用的板條,注意微孔板已經(jīng)按照統(tǒng)一排列,如下所述包被西尼羅抗原和質(zhì)控抗原。
解釋結(jié)果
1. 樣品的ISR值大于3.0視為陽(yáng)性。
2. 陽(yáng)性結(jié)果需重做證明。
3. 樣品的ISR值小于2.0視為陰性。
4. 樣品的ISR值小于3.0但是大于2.0,視為未確定,但是很有可能陽(yáng)性,實(shí)驗(yàn)需一式三份重做。
5. ISR值大于2.0是因?yàn)閃NRA和NCA的值都低造成的,應(yīng)該視為潛在假陽(yáng)性。
樣品1低OD值的范例:
計(jì)算樣品的WNRA和NCA值:
| WNRA | NCA |
1 | 0.044 | 0.190 |
NO. 2 | 0.016 | 0.007 |
總計(jì) | 0.060 | 0.026 |
平均WNRA=0.060/2=0.030
NCA=0.026/2=0.013
ISR=0.030/0.013=2.31
雖然樣品的ISR值高于2.0,但是本樣品需視為假陽(yáng)性,因?yàn)槠銸D值低,而且遠(yuǎn)遠(yuǎn)偏離了相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)品,這通常在空白值高的情況下發(fā)生。
要進(jìn)一步證實(shí)樣品,所有陽(yáng)性的結(jié)果都要用6,2層析稀釋滴定法重做,與相同滴定法的陰性質(zhì)控相比較,假如曲線是??的,平的或者是波浪型的曲線,則表明為假陽(yáng)性的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)的局限性
1. 樣品的OD值高于抗原質(zhì)控(非WNRA),導(dǎo)致ISR值小于3.0,則可能為假陰性,再釋稀樣品重新實(shí)驗(yàn),可能會(huì)獲得真正的ISR值。
2. 既然這不是一個(gè)直接檢測(cè)的方法,則需考慮假陽(yáng)性和假陰性存在的可能性。
3. 所有有反應(yīng)的樣品,應(yīng)用確定性實(shí)驗(yàn)來證實(shí)。
4. 本實(shí)驗(yàn)提供的試劑,盡可能地檢測(cè)血清或血漿中的WNRA反應(yīng)性抗體水平。
5. 應(yīng)避免反復(fù)凍融樣品和試劑。
6. 不要使用溶血或脂血的樣品,它們會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)
Focus診斷公司是美國(guó)大的診斷公司 Quest公司旗下的子公司。 該公司向醫(yī)學(xué)中心、醫(yī)院及商業(yè)實(shí)驗(yàn)室提供參考檢測(cè)服務(wù)。
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