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產(chǎn)品名稱:

人降鈣素原(PCT)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒

產(chǎn)品型號(hào): 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-03-13
ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒是一種基于酶免疫測(cè)定技術(shù)的實(shí)驗(yàn)工具,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢驗(yàn)的各個(gè)領(lǐng)域。其基本原理是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(如聚苯乙烯微量反應(yīng)板)表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行。通過(guò)洗滌法去除液相中的游離成分后,可以通過(guò)檢測(cè)固相上酶的活性來(lái)間接測(cè)定標(biāo)本中的抗體或抗原。

產(chǎn)品概述

產(chǎn)品介紹

人降鈣素原(PCT) elisa酶聯(lián)免疫試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:人降鈣素原(PCT)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱:PCT Quantitative Enzyme-linked Immunosorbent Assay Kit

【包裝規(guī)格】 96人份/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒采用ELISA雙抗體酶聯(lián)免疫夾心法定量檢測(cè)人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。適用于嚴(yán)重感染或膿毒血癥的早期診斷;全身性感染與非細(xì)菌性炎癥反應(yīng)(如自身免疫性疾?。┑蔫b別診斷;全身性細(xì)菌性感染與病毒感染的鑒別診斷;全身性細(xì)菌/真菌感染與移植排斥和移植后病毒感染的鑒別診斷;作為高?;颊撸ㄈ鏘CU、移植術(shù)后或接受免疫抑制治療的患者)感染性疾病的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。

【臨床意義】
人降鈣素原(PCT)是人降鈣素的前體物,無(wú)激素活性,其在健康人血清中水平極低,但在全身性細(xì)菌感染患者血清中含量迅速升高,感染后兩個(gè)小時(shí)即可檢測(cè)到,且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),其在血清中的水平與感染性疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān),經(jīng)有效抗生素治療后,PCT水平可迅速下降,而病毒感染、腫瘤、自身免疫性疾病、外傷(多創(chuàng)傷或手術(shù)創(chuàng)傷)、臨床用藥、慢性炎癥以及局部感染者,PCT水平維持在正常范圍內(nèi)或者有輕度升高。因此,PCT是細(xì)菌感染所致重癥全身性炎癥反應(yīng)的良好指標(biāo),在全身性細(xì)菌感染和膿毒癥輔助鑒別診斷、預(yù)后判斷、療效觀察等方面有很高的臨床價(jià)值。

在局限性感染、病毒感染、自身免疫性疾病、手術(shù)創(chuàng)傷和慢性炎癥時(shí),其血漿濃度正常或輕度升高;嚴(yán)重細(xì)菌感染或霉菌、寄生蟲(chóng)感染(如腹膜炎、軟組織感染、蜂窩組織炎、吻合口漏、肺炎、ARDS)時(shí)大量上升,特別是膿毒性休克時(shí)PCT時(shí)濃度成倍升高。因此,利用它能有效地評(píng)估感染和炎癥的嚴(yán)重程度及進(jìn)展情況,還能監(jiān)測(cè)藥物療效,指導(dǎo)外科圍手術(shù)期的處理以及抗生素正確應(yīng)用。

作為高?;颊撸ㄈ鏘CU、移植術(shù)后或接受免疫抑制治療的患者)感染性疾病的監(jiān)測(cè)指標(biāo);早期預(yù)測(cè)膿毒性休克、多器官功能不全綜合征(MODS)、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)及多器官功能障礙(MOF)的發(fā)生及判斷疾病預(yù)后等。

【檢測(cè)原理】

本試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人降鈣素原(PCT)水平。用純化的人降鈣素原(PCT)抗體包被反應(yīng)板,加入待測(cè)標(biāo)本孵育后,再加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的PCT抗體。如果標(biāo)本中含有PCT,則能與包被在反應(yīng)板上的PCT抗體結(jié)合,并與HRP標(biāo)記的PCT抗體形成復(fù)合物,經(jīng)洗滌后加入TMB底物,TMB在HRP酶的催化下產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定的吸光度(OD值)與標(biāo)本中PCT含量呈線性關(guān)系。通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線可以計(jì)算出標(biāo)本中PCT的含量。

【主要組成成份】

序號(hào)

項(xiàng)目

容量

數(shù)量

1

濃縮洗滌液(30×)

20 mL

1瓶

2

酶標(biāo)試劑

6mL

1瓶

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8條

1塊

4

樣品稀釋液

6mL

1瓶

5

顯色劑A液

6mL

1瓶

6

顯色劑B液

6mL

1瓶

7

終止液

6mL

1瓶

8

標(biāo)準(zhǔn)品(2400 ng/L)

0.5 mL

1瓶

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5 mL

1瓶

注:使用時(shí),先將瓶中內(nèi)容物搖勻,不同批號(hào)試劑盒組份請(qǐng)勿混用

【儲(chǔ)存條件及有效期】

1、 儲(chǔ)存條件:2~8℃避光保存。

2、 有效期:2~8℃避光保存,自半成品檢定合格之日起,有效期6個(gè)月。

【適用儀器】

酶聯(lián)檢測(cè)系統(tǒng):

洗板機(jī)(非必須)

一臺(tái)

酶標(biāo)儀

一臺(tái)

恒溫箱

一臺(tái)

人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒
基孔肯雅熱病毒IgM抗體檢測(cè)試劑盒
甲基安非他檢測(cè)試劑盒

【樣本要求】

1、 本試劑盒適用于定量檢測(cè)人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。

2、 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000 g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于1000 g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

4、 其它生物標(biāo)本:1000 g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

5、 樣本使用前應(yīng)置于室溫(18~30℃)平衡30分鐘。

6、 樣本稀釋時(shí)應(yīng)充分混勻,盡量避免起泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。

7、 樣本采集和處理時(shí)應(yīng)戴口罩和手套,避免汗液、唾液及其氣溶膠污染樣本。

8、 樣本檢測(cè)前如需運(yùn)輸,建議運(yùn)輸時(shí)保持2-8℃(冰盒)或-20℃(干冰),不要超過(guò)上述保存期限。

9、 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性

【檢驗(yàn)方法】

1、試劑、樣本準(zhǔn)備

⑴ 試劑準(zhǔn)備

① 將試劑盒置室溫(18~26℃)平衡15~30分鐘。

② 從試劑盒中取出濃縮洗滌液,用新鮮的純化水1:1稀釋后加入洗板機(jī)的洗液瓶中。

⑵ 樣本準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液按照下圖表將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋,制備1-5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)樣品。為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)配置新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

1200 ng/L

5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150 μL的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

600 ng/L

4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150 μL的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

300 ng/L

3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150 μL的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150 ng/L

2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150 μL的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

75 ng/L

1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150 μL的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2、試驗(yàn)條件

在室溫(18~26℃)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

3、操作步驟

(1) 取出所需的PCT抗體包被板反應(yīng)條置于微孔架上(立即將剩余的微孔反應(yīng)條放回鋁箔袋中,并重新密封鋁箔袋)。

(2) 分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50 μL,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL,然后再加待測(cè)樣品10 μL(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,置37℃恒溫箱孵育30分鐘。

(3) 小心揭掉封板膜,棄去孔內(nèi)液體,洗滌液注滿各孔、靜置30秒,甩干,重復(fù)5次,拍干。或者利用洗板機(jī)洗滌:程序4個(gè)循環(huán),每孔350 μL,洗滌后拍干。

(4) 加入酶結(jié)合物,每孔加入酶標(biāo)試劑50 μL,空白孔除外,充分混勻,置37℃恒溫箱孵育30分鐘。

(5) 重復(fù)操作程序③

(6) 加入顯色劑A50 μL,再加入顯色劑B50 μL,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

(7) 每孔加終止液每孔50 μL,充分混勻,終止反應(yīng)。

(8) 以空白孔調(diào)0,用酶標(biāo)儀依序測(cè)量各孔在450 nm波長(zhǎng)的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

4、試驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算

可以采用作圖法或計(jì)算法進(jìn)行結(jié)果計(jì)算,推薦采用計(jì)算法。

作圖法:以標(biāo)準(zhǔn)品抗原含量為橫坐標(biāo)(x),以其對(duì)應(yīng)的吸光值(OD值)為縱坐標(biāo)(y)繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后根據(jù)檢測(cè)樣本測(cè)得的吸光度(OD值)在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的樣本抗原含量,再乘以樣本稀釋倍數(shù),即為樣本的實(shí)際濃度。

計(jì)算法:以標(biāo)準(zhǔn)品抗原含量為自變量(x),以其對(duì)應(yīng)的吸光值(OD值)為應(yīng)變量(y),求出回歸方程,將待測(cè)樣本的吸光值代入回歸方程,求得對(duì)應(yīng)的標(biāo)本抗原含量,再乘以樣本稀釋倍數(shù),即為樣本的實(shí)際濃度。

【檢測(cè)范圍】

75ng/L -1200ng/L

【參考值(參考范圍)】

健康人:<500 ng/L

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

對(duì)PCT陽(yáng)性檢出者,應(yīng)結(jié)合病史、臨床癥狀及體征等綜合判斷。以PCT含量<500 ng/L的為陰性,對(duì)PCT含量在100~500 ng/L之間者,建議動(dòng)態(tài)觀察。對(duì)PCT含量大于1200 ng/L的樣本,應(yīng)準(zhǔn)確稀釋后重做,后將測(cè)得的PCT含量乘稀釋倍數(shù)即為該樣本實(shí)際PCT含量。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

PCT的水平作為診斷、監(jiān)測(cè)重癥感染患者的常規(guī)指標(biāo),不能作為是否存在細(xì)菌和病毒感染的決定依據(jù)。對(duì)PCT檢測(cè)結(jié)果的解釋需結(jié)合其他臨床檢查結(jié)果和根據(jù)臨床疾病診斷的程序。

需要注意的是:

(1) 在病毒感染或非感染性炎癥反應(yīng)時(shí),血PCT水平不升高或僅有輕度升高。

(2) PCT水平測(cè)定不能特異性反映病原體類型及其對(duì)抗生素的敏感性和耐藥性;必須同時(shí)結(jié)合病原學(xué)檢查和藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果以提高治療的針對(duì)性。

(3) 接受OKT3免疫抑制治療的移植患者PCT水平常有提高,這可能是細(xì)胞因子釋放綜合征的繼發(fā)表現(xiàn),應(yīng)用OKT3后PCT水平的升高并不一定提示感染的存在,須結(jié)合其他指標(biāo)綜合分析。

(4) 膿毒血癥患者不論是否接受免疫抑制治療,其在發(fā)生膿毒癥的初3天內(nèi)PCT水平并無(wú)差異,隨后免疫缺陷患者在第3~5天時(shí)PCT 值有所減低,而免疫力正常的患者至第5天后PCT水平才開(kāi)始下降,對(duì)于膿毒血癥患者建議采取動(dòng)態(tài)觀察。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1. 特異性:

20份正常人血清PCT 檢測(cè)結(jié)果不得出現(xiàn)一份大于500 ng/L。

2. 低檢出量:低檢出量為40 ng/L。

3. 線性范圍:75ng/L~1200ng/L,相關(guān)系數(shù)r應(yīng)不低于0.98。

4. 穩(wěn)定性:37℃放置3天,檢定結(jié)果應(yīng)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。

【注意事項(xiàng)】

1. 試劑盒使用前應(yīng)置于室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2. 使用時(shí),先將瓶中內(nèi)容物搖勻,不同批號(hào)試劑盒組份請(qǐng)勿混用。

3. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

4. 嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間和顯色時(shí)間,一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)。

5. 本試劑盒為一次性用品,使用后的試劑盒和樣本等廢棄物應(yīng)作為傳染源按照國(guó)家相關(guān)規(guī)定處理。

6. 底物請(qǐng)避光保存。

7. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

8. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),無(wú)效結(jié)果必須重測(cè)。

9. 本試劑盒采用硫酸作為終止液,其具有輕微的腐蝕性,使用時(shí)應(yīng)避免接觸衣物或眼、手等皮膚暴露部位。

公司優(yōu)勢(shì):
1)質(zhì)量:我司提供的的試劑均經(jīng)過(guò)出廠檢測(cè)。不對(duì)可退換。
2)價(jià)格:價(jià)格實(shí)惠,量大從優(yōu)。
3)服務(wù):提供完整的售前、售后和售中服務(wù)。售后到底。
除了檢測(cè)人降鈣素原(PCT)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒我公司還提供:?

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