產(chǎn)品名稱:AGS(胃腺癌細(xì)胞)?
產(chǎn)品使用
1)本產(chǎn)品僅能用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
?1)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝細(xì)胞處理:
2) 含量:>1x10^6?
3) 污染:經(jīng)檢測不含支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
4) 來源:ATCC
5) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁
?4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
3.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以聯(lián)系客服,我們隨時給予解答。
?1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。?注意事項:
HL-60是一株早幼粒細(xì)胞。外周血白細(xì)胞來自一位患有急性粒-單核細(xì)胞白血病的36歲白人女性。 HL-60 自發(fā)分化,丁酸鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放線菌素D和視黃酸可以促進(jìn)分化。細(xì)胞表現(xiàn)出吞噬活性,并對趨化刺激有響應(yīng)。致癌基因myc表達(dá)陽性。
?2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
1、 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
該細(xì)胞是從一名13歲的白人女性的骨肉瘤組織中分離建立的,表現(xiàn)為扁平形態(tài)、低飽和密度、軟瓊脂中的低克隆形成率和對化合物及病毒感染的敏感性。
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2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
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