動物細胞培養(yǎng)技術是當今生物工程領域中的前沿技術之一,無論是在研究還是在生產實踐方面都對當代生物技術有著重要的影響。近年來隨著臨床需求的增加,單克隆抗體藥物發(fā)展迅速,如何提高哺乳動物細胞生產治療性抗體的產量和質量越來越受到重視。
細胞培養(yǎng)基是人工模擬動物細胞的體內生長環(huán)境,維持體外細胞存活和增殖的營養(yǎng)物質基礎,其主要功能是為細胞提供適宜的pH和滲透壓,以及細胞本身不能合成的各種營養(yǎng)物質。
培養(yǎng)基的主要作用是促進和維持細胞的生長發(fā)育,其開發(fā)策略可以分為兩類:自上而下和自下而上。自下而上的策略指的是,對培養(yǎng)基中各種單一營養(yǎng)成分的不同濃度造成其對細胞生長和對產物產生的不同影響進行考察。該策略需要耗費大量的時間進行大量的試驗,進而著重考察的是每一個組分對細胞的影響。而自上而下的策略指的是將培養(yǎng)基分成許多個不同的亞型,針對各個亞型先進行篩選和組合,而后再進行組內的優(yōu)化。
細胞培養(yǎng)基必須含有充分的營養(yǎng)物質,才能滿足新細胞合成、細胞代謝等生化反應所需要的物質和能量。其主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助營養(yǎng)物質等。此外,還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。
通常液體細胞培養(yǎng)基避免-20℃凍存,因為解凍時可能會有營養(yǎng)成份析出,影響培養(yǎng)效果。正常情況下于2~8℃避光保存,使用前從冰箱取出,放入室溫進行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個月到12個月。盡量避免長期貯存,其中的谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解,如果細胞生長不良,可考慮檢測培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補加谷氨酰胺。