ELISA檢測試劑盒在的實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。如雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、應用親和素和生物素的ELISA。在今天的技術內容中,為您詳解ELISA方法設計的原理根據(jù)。
ELISA檢測試劑盒以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。
ELISA檢測試劑盒試驗3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此計劃,則棄去,算了另兩個陰性對照從頭核算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上計劃,則該次試驗無效。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這么能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。現(xiàn)舉某種檢查ELISA檢測試劑盒為例,先讀出標本、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行核算。核算方法有多種,大致可分為陽性斷定值法和標本與陰性對照比值法兩類。陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。
夏天正在進行中,溫度還是很熱,ELISA檢測試劑盒也是要好好保存,這樣才不會影響ELISA檢測試劑盒的運用功能。那么ELISA檢測試劑盒要怎樣保存?
1.ELISA檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗刷液可能會有結晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。
3.各步加樣均應運用加樣器,并常常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時刻好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦運用排槍加樣。
4.請每次測定的一起做規(guī)范曲線,好做復孔。如標本中待測物質含量過高,請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測定,核算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性運用,以避免穿插污染。
6.底物請避光保存。
ELISA檢測試劑盒快遞路上3-7天是無任何質量問題的,提示客戶,拿到所購產(chǎn)品時請放置供給的試劑盒保存:-20℃;2-8℃(頻頻運用時)